Terapia experimental com células-tronco do nariz pode ser caminho para tratar lesão na medula

Um trabalho realizado em colaboração em diferentes centros da USP investigou um novo tipo de tratamento para lesões agudas na medula espinhal em ratos. O objetivo foi analisar as respostas e recuperação dos animais após sofrerem contusão quando injetados com células da mucosa olfatória, que no grupo testado mostrou evolução significativa. 

A medula espinhal integra parte do sistema nervoso central. É um tecido frágil e de extrema importância, responsável por transportar estímulos do cérebro para o resto do corpo, ou seja, uma importante peça do sistema neurológico. Em situações como acidentes automobilísticos e quedas de significativas alturas, lesões na medula espinhal são um cenário comum e grave em centros de trauma hospitalares. 

Essas lesões, principalmente em estado grave, são consideradas de difícil tratamento por se tratar de um tecido neurológico considerado de baixa plasticidade. Isso significa que esses tecidos têm baixa capacidade de adaptação e reconstrução após um insulto. Atualmente as principais formas de tratamento recomendadas são estratégias de suporte, como medicamentos e fisioterapia para amenizar a lesão e auxiliar na recuperação do paciente.  

“Sabemos que é um caminho muito difícil a investigação das lesões medulares, porque ainda não temos, do ponto de vista assistencial, validado para aplicação prática, nenhum insumo material ou terapia que consiga fazer uma reversão das lesões”, detalha Brian Coimbra, autor da tese defendida na Faculdade de Medicina da USP (FMUSP) com orientação do professor Alexandre Fogaça. “Então sabíamos que seria difícil conseguir um resultado ultraexpressivo de recuperação neurológica, mas nós obtivemos alguns resultados positivos”, completa o médico.

A pesquisa foi feita a partir da cooperação entre diferentes centros e unidades, entre eles o Laboratório de Genômica Funcional do Instituto de Biociências (IB) da USP, o Laboratório de Estudos de Trauma, Raquimedular e Nervos do Instituto de Ortopedia (Letran) e o Departamento de Patologia da FMUSP, principal responsável pela análise dos espécimes obtidos na pesquisa.

A ideia de utilizar as células-tronco da mucosa nasal ganhou força com a pandemia de covid-19, quando pacientes infectados começaram a perder capacidade olfatória e, tempos depois, recuperavam o sentido. Esse fenômeno permitiu que os cientistas entendessem melhor um tipo celular chamado de célula ectomesenquimal, que atua no processo de regeneração contínua da mucosa olfatória.

“Durante o nosso dia a dia, temos agressões nessa mucosa olfatória pelos poluentes do ar, e algumas dessas células vão morrendo e outras vão se regenerando a partir das células-tronco que são residentes no nosso olfato”, explica Coimbra. Além disso, as mucosas olfativas são de fácil e pouco invasivo acesso, questão que já dificultou o estudo de outras células para o processo de regeneração medular. “Foram testadas células do cordão umbilical e do tecido de medula óssea, por exemplo, mas elas apresentaram dificuldade de obtenção, uma eficácia não tão boa ou restrição de resultado.”  

Dentre as hipóteses iniciais da pesquisa, estava a ideia de que as células ectomesenquimais poderiam ajudar no processo de cicatrização e recuperação do tecido lesionado, tese comprovada pelos testes realizados em laboratório com um grupo de ratos que teve as células injetadas em seu organismo e se recuperou rapidamente. 

Para analisar o funcionamento das células ectomesenquimais nos roedores com algum tipo de contusão na medula espinhal, o estudo utilizou um modelo de lesão medular chamado Mass Impactor, no qual é possível programar a queda de um peso em determinada altura causando assim, uma lesão. É possível regular a altura a fim de criar uma lesão mais aguda, ou seja, com maior dano neurológico, ou uma lesão mais superficial.

No caso dos ratos Wistar utilizados para o desenvolvimento da terapia experimental, foi usado o ponto de 12,5 milímetros de queda dessa massa: “O rato sofre uma lesão neurológica que é visível, mas que permite que ele tenha uma função ainda residual nos membros e assim permite a sua sobrevivência”, explica Coimbra. “Precisamos encontrar um jeito de fazer uma lesão que não cause uma perda total no indivíduo [rato], ou seja, que ele se torne inviável para continuar sendo estudado na pesquisa”, detalha. 

As células da mucosa nasal utilizadas na análise foram obtidas a partir do septo nasal dos ratos, por um método cirúrgico desenvolvido por Coimbra para uma extração mais eficiente das células olfatórias, sem hemorragia. “O grande problema de coletar o septo nasal dos ratos é que eles sofriam uma contaminação hemorrágica importante. Então, quando você tirava o septo, o sangramento contaminava esse septo e inviabilizava as células”, explica. 

Ao todo, foram 60 ratos acompanhados por seis semanas apenas após a lesão na medula espinhal e divididos em cinco diferentes grupos, sendo dois deles os grupos um e dois, utilizados como grupo de controle e outros três como experimentais. 

Nos dois primeiros grupos foram aplicadas técnicas para facilitar o acesso à medula espinhal dos animais. No grupo um foi realizado um procedimento cirúrgico chamado de laminectomia, com o objetivo de alçar o nervo sem lesá-lo. 

No grupo dois, a técnica foi a associada a outro procedimento, a abertura do saco dural, membrana que protege a medula espinhal e é impermeável para algumas substâncias. O objetivo foi garantir que as células ectomesenquimais atingissem diretamente o nervo, não apenas a membrana. 

As lesões na medula começaram a ser aplicadas nos roedores, juntamente com os procedimentos cirúrgicos, a partir do grupo três. O grupo também foi importante para a definir o dano da contusão padrão que seria aplicada nos outros animais.

O grupo quatro contou com a utilização do matrigel, um composto biológico gelatinoso. Nesse caso, o material foi utilizado como veículo, um meio no qual as células são injetadas e levadas até o local desejado sem que sejam carregadas para outros locais do organismo que não o da lesão tratada. O composto é rico em laminina, uma proteína que possibilita a conexão entre células do sistema nervoso e que foi alvo de atenção com os estudos sobre a polilaminina, uma molécula descoberta recentemente que também passa por testes para translação de tratamento de lesões na medula espinhal humana. 

O grupo cinco foi o que apresentou resultados mais expressivos e contou com a junção dos métodos aplicados anteriormente mais as células ectomesenquimais da mucosa nasal dos roedores. Os ratos voltaram a andar na terceira semana do experimento, indicando o grande potencial de regeneração neurológica das células utilizadas e seu desempenho significativo na recuperação da função motora.

A pesquisa revogou a teoria de que se as células-tronco — células com capacidade de renovação — fossem colocadas no local em que a medula sofreu uma lesão, poderiam ocupar o local lesionado e estabelecer um novo canal de condução. Segundo Coimbra, o que ocorre é na verdade uma ação em que as células-tronco recrutam substâncias que favorecem a regeneração neuronal na região, “não é que elas [as células] vão ocupar o lugar da falha do nervo, elas carregam substâncias e atraem substâncias para esse local, geram substâncias ali que vão ajudar justamente a recuperação”, explica. 

Apesar de resultados positivos, a ação em nível molecular da atuação das células ainda precisa de maior investigação. Os próximos passos do estudo estão voltados para a entender melhor o nível molecular da atividade, bem como uma translação do tratamento para humanos pensando em desenvolvimentos de fármacos, por exemplo.